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液相色谱仪色谱柱维护

    每天用足够的时间来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!------ 一定得做!
新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试,即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。并且,在以后的使用中,应时常对色谱柱进行测试。

平衡色谱柱  
   
反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。
硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡
平衡过程中,将流速缓慢地提高
用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)

色谱柱的再生   
   
进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。

建议用来冲洗的溶剂体积
    色谱柱尺寸     柱体积     所用溶剂的体积 
      125 - 4            1.6ml               30ml
            250 - 4            3.2ml               60ml
            250 - 10          -20ml             400ml

    请根据下表选择您的再生方法:

    极性固定相(如SiNH2DIOL基色谱填料)的再生:
    正庚烷氯仿乙酸乙酯丙酮乙醇

    非极性固定相(如反相色谱填料RP18RP8CN等)的再生:
    水乙腈氯仿(或异丙醇)乙腈
        0.05M
稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱

    色谱柱的维护 
        1
.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)
        2
.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是27.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围
        3
.避免流动相组成及极性的剧烈变化
        4
.流动相使用前必须经脱气和过滤处理
        5
.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中
        6
.压力升高是需要更换预柱的信号

 
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